如何防止银屑病的复发 尿酸650多久能得尿毒症( 三 )


另外纯蛇粉、有机锗等营养品都可经常食用 。
sod测定方法有哪些?超氧化物歧化酶(SOD)的催化底物是O2 , 一般多以一定时间内产物生成量或底物的消耗量作为酶活性单位 。由于O2自身很不稳定 , 且不易制备 , 测定SOD的方法除少数采用直接法外 , 一般多为间接法 。
1.直接法原理是根据O2或产生O2的物质本身的性质测定O2的歧化量 , 从而确定SOD的活性 。经典的直接法包括:脉冲辐射分解法、电子顺磁共振波法(EPR)、核磁共振法 。由于所需的仪器设备价格昂贵 , 一般较少应用 。
2.一般化学法这些方法的共同特点是要有一个O2的产生体系和一个被O2还原或氧化的可检测体系 。在SOD存在下 , 一部分O2被SOD歧化 , 因而O2还原或氧化检测体系的反应受到抑制 。根据反应受抑制程度 , 测定SOD的活性 。
一般化学法有邻苯三酚自氧化法、细胞色素C还原法、羟胺法、黄嘌呤氧化酶-NBT法、肾上腺素法、没食子酸法、6-羟多巴胺法、亚硝酸盐形成法和碱性二甲亚砜法 。常用的有:⑴邻苯三酚自氧化法:即改良Marklund法 。原理是基于经典的分光光度法 , 在碱性条件下 , 邻苯三酚自氧化成红桔酚 , 用紫外-可见光谱跟踪波长为325nm、420nm或650nm(经典为420nm) , 同时产生O2 , SOD催化O2发生歧化反应从而抑制邻苯三酚的自氧化 , 样品对邻苯三酚自氧化速率的抑制率 , 可反映样品中的SOD含量 。
本法具有特异性强 , 所需样本量少(仅50μl) , 操作快速简单 , 重复性好 , 灵敏度高 , 试剂简单等优点 。⑵细胞色素C还原法(McCord法):原理是黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系中产生的O2使一定量的氧化型细胞色素C还原为还原型细胞色素C , 后者在550nm有最大光吸收 。在SOD存在时 , 由于一部分O2被SOD催化而歧化 , O2还原细胞色素C的反应速度则相应减少 , 即其反应受到抑制 。
将抑制反应的百分数与SOD浓度作图可得到抑制曲线 , 由此计算样品中SOD活性 。本法是间接法中的经典方法 , 但本法灵敏度较低 。
3.化学发光法原理是黄嘌呤氧化酶在有氧条件下 , 催化底物黄嘌呤或次黄嘌呤发生氧化反应生成尿酸 , 同时产生O2 。后者可与化学发光剂鲁米诺反应 , 使其产生激发 。SOD能清除O2从而抑制鲁米诺的化学发光 。本法可应用于SOD的微量测定 , 不仅灵敏度高 , 简便易行 , 而且特异性与准确性至少与细胞色素C还原法类似 。
4.免疫学方法上述方法测定的是SOD活性 , 免疫学方法则可测定样品中SOD的质量 , 因此特异性较好 , 是较理想的测定SOD方法 , 免疫法有放射免疫法、化学发光免疫分析法、ELISA法等 。但其缺陷是只能测定抗体相应的抗原 , 对于检测不同种类的SOD , 则须制备相应的特异性抗体 , 手续繁琐 。
5.电泳法电泳染色定位法的基本原理是根据光化学法与NBT还原法 。电泳则采取垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳 。既可采用SOD活性正染色(呈现棕带)也可采取SOD活性负染色(呈现无色透明区带) 。根据凝胶上电泳分离的SOD区带的着色深浅与面积大小 , 对样品进行半定量分析 , 也可制作校正曲线计算样品中的SOD含量 。染色定位法常用于鉴定SOD , 很少为了定量 , 主要原因是它不及化学法简便 , 但鉴定SOD却较化学法为优 。


特别声明:本站内容均来自网友提供或互联网,仅供参考,请勿用于商业和其他非法用途。如果侵犯了您的权益请与我们联系,我们将在24小时内删除。