琼脂糖凝胶电泳原理

1、琼脂糖凝胶电泳原理:琼脂糖凝胶具络 , 物质分子通过时到阻力 , 大分子物质在涌动时受到的阻力大 , 因此在凝胶电泳中 , 带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量 , 而且还取决于分子大小 , 这就大大提高了分辨能力 。但由于其孔径相比于蛋白质太大 , 对大多数蛋白质来说其分子筛效应微不足道 , 现广泛应用于核酸的研究中 。琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法 。其分析原理与其他支持物电泳最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用 。
【琼脂糖凝胶电泳原理】2、核酸是两性电解质 , 其等电点为pH2-2.5 , 在常规的电泳缓冲液中(pH约8.5) , 核酸分子带负电荷 , 在电场中向正极移动 。核酸分子在琼脂糖凝胶中泳动时 , 具有电荷效应和分子筛效应 , 但主要为分子筛效应 。线状双链DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比 , 分子越大则所受阻力越大 , 也越难于在凝胶孔隙中移动 , 因而迁移得越慢 。


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