医学魔改大师玩跨界,CRISPR遇见分子诊断( 四 )


Q5:相比qPCR技术 , CRISPR核酸检测技术主要有哪些优势?CRISPR核酸检测技术产业化尚需解决的核心问题有哪些?从国外的技术和临床试验对比来看 , 国内CRISPR核酸检测技术正处于怎样的发展阶段?
王弢:
相比qPCR , CRSIPR核酸检测技术拥有独特优势:
1. 复杂背景下的高灵敏度 , 可对aM(10-18M)浓度的靶核酸分子进行高效检测;而qPCR技术很难实现复杂背景下靶分子的有效扩增 。
2. 复杂背景下的高特异性 。 CRISPR核酸检测技术具有极为优异的抗干扰性能 , 可实现对单碱基异常的精确监测;qPCR影响因素多 , 抗干扰能力差 , 难以避免假阳的存在 。
3. 更为简易的操作 , 无需依赖较大的仪器 , 10-60分钟内完成扩增全程;qPCR依赖多步骤的复杂操作 , 严格环境控制 , 耗时1-3小时 , 需要复杂的大型精密仪器 。
张明东:
CRISPR核酸检测技术具有高灵敏度、高特异性和极为显著的抗干扰等优势 , 但如何实现核酸预扩增和CRISPR一体化反应是一个难题 , 以及如何实现单人份或高通量快速检测也是不同场景下应用的需要 , 还有各种关键生物酶的产业化是需要解决的核心问题 。
王弢:
国内CRISPR核酸检测技术的发展处于快速发展的起步阶段 , 整个产业链还不是很成熟 。 成熟的CRISPR核酸检测技术如果应用于院外场景 , 需做到:
1. 快速 , 通常1小时内完成检测 。
【医学魔改大师玩跨界,CRISPR遇见分子诊断】2. 防污染 , 全封闭操作 。
3. 高性能 , 灵敏度和特异性高于或等同于qPCR 。
4. 便捷 , 各检测试剂All in于一管 。
5. 常温储运 。
结束语 基因组中的微小改变 , 会带来有机体的巨大变化 。 随着科研人员对生命系统的研究不断深入和资本市场的强力支持 , 我们有理由相信 , 在不远的将来 , 我们将会看到CRISPR/Cas更加广泛、成熟地运用于临床 , 有效治疗各种遗传疾病 。 但值得警惕的是 , 这项革命性的技术也是一把双刃剑 , 只有完善相关法律法规 , 厘清科技与伦理的边界 , 规范科研行为 , 才能引导基因编辑领域的健康发展 。
参考资料
[i]. 近日 , 一篇发表在国际杂志Nature Communications上题为“A systematic genome-wide mapping of oncogenic mutation selection during CRISPR-Cas9 genome editing”的研究报告中 , 来自美国国立卫生研究院等机构的科学家们通过研究发现 , 基于CRISPR/Cas的基因编辑(尤其是基因敲除)或许会让正常细胞产生与癌症相关的基因突变形式 , “基因剪刀”再引争议 。
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生命科学与医疗健康行业课题组
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