在上一期的核酸脂质纳米粒主题文章中 ， 我们列举了后处理的步骤及细节 ， 其中一项关键内容——超滤除溶剂——使用的就是市面上较为常见的超滤管 。 但看似相同的超滤管实际上有多种规格 ， 通常以相对分子质量（Dal或kD）来标示 ， 如10 kD、50 kD、100 kD等 。 数字越大 ， 代表了滤膜的孔径越大 ， 截留下来的物质分子量也相应更大 。
【核酸脂质纳米粒科普——超滤管规格】 在我们销售微流控仪器时 ， 就经常会接到客户的提问：究竟多少规格的超滤管适合自己制作的核酸脂质纳米粒呢？同时 ， 我们也发现 ， 尽管有些客户包裹的是相似长度的核酸 ， 使用的超滤管规格却完全不同 。 因此在这篇文章中 ， 我们将通过计算来确定使用的超滤管规格 。
一般而言 ， 为了保证我们需要的物质能够几乎完全被截留 ， 选用的规格大小在目标物质的分子量的1/3甚至1/4较为合适（这是在蛋白组学、生物化学等领域的一个经验值 ， 也可根据实际产物进行调整） 。 规格过大会导致大部分目标产物流失；规格过小则会导致超滤时间急剧增大 ， 这对于在有机溶剂中不稳定的核酸脂质纳米粒而言是致命的 。
确定了规格大小和目标物质分子量之间的比例后 ， 下一步需要确定目标物质的相对分子质量 。 在这里 ， 首先需要明确相对分子质量（Mr ）单位Dal与物质的摩尔质量（ M）单位g/mol之间的关系 。 相对分子质量是该分子的质量与“一个12 C原子质量的1/12”的比值；摩尔质量则是单位物质的量的物质所具有的质量——看似非常绕 ， 但实际上两者的数值是相等的 。 例如胆固醇的摩尔质量为386.65 g/mol ， 而 一个 胆固醇分子的相对分子质量也为386.65 Dal ， 其中不同就是摩尔质量是一个宏观整体的概念 ， 而相对分子质量则需要确定对象的具体情况 ， 对于核酸而言就是要确认组成核酸的碱基数量 。 在氮磷比计算 一文中 ， 我们提到碱基的平均摩尔质量为330 g/mol ， 所以一个碱基的相对分子质量为330 Dal 。
假设我们的mRNA具有n个碱基 ， 则其相对分子质量为330n Dal ， 如果我们希望这个值为超滤管规格的3倍 ， 则意味着超滤管的规格不得大于110n Dal ， 由此我们就可以得到下方一个简单的表格 。

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由此我们可以看到 ， 其关系直接明了 。在实际使用过程中 ， 超滤管通常不会超过100 kD ， 因此 ， 只 要我们的核酸碱基超过909个 ， 便可以使用100 kD的超滤管 。当然 ， 为了保险起见 ， 也可以使用50 kD超滤管 。需要注意的是 ， 以上均以mRNA为例 。如果为短链siRNA ， 通常在一个纳米粒中会有多个的siRNA链 ， 因而在计算的时候要乘以相对应的数量 。
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