1. 为了节省病毒 ， 推荐使用96孔板进行预实验 。
2. 将目的细胞接种于96孔板中 ， 细胞融合率为50%为最佳 。 为保证细胞生长良好 ， 请保证细胞贴壁过夜 。
3. 取10ul AAV病毒原液加入90 ul培养基中做1:100稀释（10-2） ， 以此为起点做梯度稀释直至稀释10-7 。 可根据实际情况降低或提高稀释倍数 。
4. 取出提前准备好的96孔板 ， 先确定细胞生长状况是否良好 。 用准备好的病毒稀释液替代旧培养基 ， 注意保留未加入病毒的细胞孔作为对照组 。
5. 在加入病毒稀释液后 ， 请在12-24h后观察细胞状态来确认加入的病毒量是否合适 ， 是否因为加入的病毒量影响细胞状态 。 如果细胞没有变化 ， 即所加病毒对细胞没有毒性 ， 可以继续培养 。
6. AAV病毒对细胞的感染较慢 ， 请在感染细胞后每天观察细胞中荧光表达情况 。(成功案例: 山大医院学生
利用我司提供的AAV病毒感染jurkat ， ca46细胞,在MOI值105时,
一个星期后看到荧光表达,并且成功通过WB检测到目的基因的表达)（如果您选择的产品带有GFP标签 ， 如果没有荧光标签请选择在96小时以后的不同时间段分别收获细胞并通过Western-Blot或其他检测手段来检测基因表达） 。
注：由于AAV组织特异性 ， 体外感染细胞的效率比较低 ， 所以我们强烈推荐您购买AAV用于动物实验 。

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AAV使用情况实例分析
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AAV使用情况实例分析
1.AAV感染不同种类的细胞
HEK293T
AAV虽然也可体外感染一些细胞 ， 但感染效率比较低 。 具体感染效率可以参考本手册的常见问题解答中的附表 。
2.AAV感染神经干细胞
Sorted cells were expanded for an additional26 days (total 40 days after AAV infection), and ~94.5% of cells maintained GFP and nestin expression
Jang J H, Koerber J T, Kim J S, et al. An evolved adeno-associated viral variant enhances gene delivery and gene targeting in neural stem cells[J]. Molecular Therapy, 2011, 19(4): 667-675.
由于AAV的低免疫原性 ， 即便感染干细胞 ， 也不会引起细胞的分化 。
3.各种类型的重组AAV注射入不同神经发育阶段的小鼠脑内产生不同分布
Chakrabarty P, Rosario A, Cruz P, et al. Capsid serotype and timingof injection determines AAV transduction in the neonatal mice brain[J]. PloS one, 2013, 8(6): e67680.
注射方法：脑室注射
注射剂量：2×1010 v.p
4.不同血清型的AAV感染心脏心肌细胞
由于组织特异性 ， 即便提高病毒的注射量 ， 对于低表达的血清型 ， 其所携带基因的表达水平没有太大的改善 。 由图可知 ， AAV9型对心肌细胞的感染效率极高 ， AAV8次之 。
5.重组AAV1-SERCA2a转导入猪冠状动脉的表达
Hadri L, Bobe R, Molecular Therapy, 2010, 18(7): 1284-1292.
注射方法：冠状动脉注射
注射剂量：1012v.p
6. AAV1特异性感染中枢神经系统以及不同类型AAV感染中枢神经系统的效果
Edmund R Hollis II ，Ken Kadoya ，Matthew Hirsch ，Richard J Samulskiand Mark H Tuszynski， Molecular Therapy , vol16 ,no. 2, feb, 2008.
注射方法：神经肌肉注射
注射剂量：2.1x10E8 v.p
分别用AAV1-6感染中枢神经系统 ， AAV1的效果好 ， 感染运动神经元的数目最多 。
7.不同血清型AAV 体外注射大鼠5天后在脑的海马回中的表达
Ronald L. Klein, Robert D. Dayton, Nancy J. Leidenheimer, Karen Jansen, Todd E. Golde, and Richard M. Zweig. MOLECULAR THERAPY, 2006, 3 , 13(3).