4.重组AAVs的克隆容量有多大?
AAV具有?4.7Kb的包装能力 。 2个ITR之间插入的DNA长度接近允许的最大值4.7Kb时 , 包装效率显著降低 。 例如 , 对于过表达来自cDNA的基因 , CMV-poly(A)信号元件约为1KB , 因此最大可包装的cDNA长度约为3.2kb , 如果共表达GFP(约0.8kb) , 则可包装的容量大约为2.4kb 。
5.哪些血清型的 AAV 可供选择?我该选用哪种AAV呢?
目前为您提供的AAV 血清型为AAV1 , AAV2 , AAV5 , AAV7 , AAV6 , AAV8 & AAV9 。 请参阅下面指南中参考文献的建议 。
请同时参阅转染效率与不同细胞类型对照表 , 以确定哪种血清型AAV更适合您的细胞 。
6.使用重组腺相关病毒rAAV传递基因的优势是什么?
rAAV病毒滴度很高 , 可感染分裂和非分裂细胞、免疫原性极小、体内表达外源基因时间长 。
7.AAV 载体稳定吗? 如何保存AAV载体 ?
纯化的AAV载体在4℃或更低温度下高度稳定 。 建议您将AAV分装后 , -80℃下长期保存 。
8.订制AAV服务 , 客户需要提供哪些材料? &客户收到的产品是怎样的?
您可以从我们的人源全长cDNA库(17,000预制ORF)中挑选 , 或者提供您的质粒DNA或DNA序列 , 我们将基因克隆至AAV载体 。 您还可以指定特定的融合标签和AAV血清型 。
基因沉默服务 , 请您提供确切的shRNA的序列以构建重组rAAV载体 。 我们的标准载体具有U6启动子和GFP标记 。
【知识分享:腺相关病毒(AAV)表达系统】通常情况下 , 可为客户提供500 ul病毒液1×10^12 V.G. /ml 。 也可根据客户的需要 , 提供特定体积和滴度的产品 。
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